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  • 食品中霉菌檢測(cè)常見問題的匯總!

    點(diǎn)擊次數(shù):1558  更新時(shí)間:2022-05-10

    霉菌:

    不是分類學(xué)上的名詞,而是一些絲狀真菌的通稱,屬真菌的一部分;其對(duì)人類具有雙重性,有利的方面是它可以用來釀造、工業(yè)發(fā)酵、抗生素和酶制劑的生產(chǎn)等,不利方面是它能引起農(nóng)副產(chǎn)品、食品、原料及器材的腐爛,也感染并引起人類和動(dòng)、植物的多種疾病,少數(shù)種類,如黃曲霉,能產(chǎn)生黃曲霉毒素,黃曲霉毒素是一種致癌物質(zhì),危害人、畜的健康和生命。因此,霉菌的檢測(cè)對(duì)于食品的安全性很重要。

    食品中常見的霉菌:毛霉屬、根霉屬、曲霉屬、青霉屬等。

    圖片

    檢測(cè)中的注意事項(xiàng):

    1、 取樣的代表性。

    2、 取樣工具的無菌。空氣中霉菌的孢子含量很高,所以,取樣的工具、容器等要經(jīng)過嚴(yán)格的高壓滅菌。

    3、 檢樣的方法。

    (1)由于霉菌易被攜帶,所以,檢樣時(shí)操作人員應(yīng)盡量避免自身攜帶的可能。

    (2)樣品的均質(zhì)及充分振搖。因?yàn)橛行╂咦邮沁B成串的,故均質(zhì)和振搖能使其充分散開,同時(shí),在各梯度連續(xù)稀釋時(shí),也要用滅菌吸管反復(fù)吹吸幾次,使孢子充分散開。

    4、培養(yǎng)溫度和時(shí)間。培養(yǎng)溫度 25-28℃培養(yǎng),5 天后觀察。

    霉菌檢驗(yàn)中常用的培養(yǎng)基:孟加拉紅瓊脂、馬鈴薯葡萄糖瓊脂、察氏瓊脂、高鹽察氏瓊脂等。

    5、檢樣中常見的問題。

    (1) 不同稀釋度計(jì)數(shù)結(jié)果不相同;

    (2) 不生長(zhǎng)或生長(zhǎng)很好連成片無法計(jì)數(shù);

    原因:①稀釋時(shí)未經(jīng)反復(fù)振搖,吹吸,導(dǎo)致孢子未充分散開,影響了計(jì)數(shù)的結(jié)果。

    ②由于培養(yǎng)基不適宜,PH 值低等,致使生長(zhǎng)較慢。

    ③觀察時(shí)間的掌握。真菌生長(zhǎng)較慢,故需 5d 后才能觀察出結(jié)果。

    微生物操作中常見問題的討論與分析

    1、 劃線獲得單個(gè)菌落的方法。劃不出單個(gè)菌落的原因:

    (1) 平板上有過多的水分;

    (2) 劃線時(shí)接種環(huán)未經(jīng)反復(fù)灼燒;

    (3) 多區(qū)劃線,三區(qū)或四區(qū)劃線。

    2、 涂布和傾注的區(qū)別:

    涂布利于觀察,但由于涂布棒上會(huì)帶有少量的菌液,可能影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性;傾注更為準(zhǔn)確,但不利于觀察菌落的狀態(tài)。

    3、 培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng)注意的問題:

    (1)滅菌溫度要嚴(yán)格控制,按照要求滅菌,尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應(yīng)太高,過高會(huì)導(dǎo)致糖分焦化,影響質(zhì)量;

    (2)瓊脂培養(yǎng)基不能反復(fù)溶化。反復(fù)溶化會(huì)破壞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分;

    (3)培養(yǎng)基不能反復(fù)滅菌,反復(fù)滅菌也會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)成分的破壞;

    (4)含瓊脂的培養(yǎng)基滅菌后,要搖勻。

    4、 平板的保存:

    大多數(shù)平板如 VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。

    5、 產(chǎn)品的保存:

    (1) 干粉培養(yǎng)基:避光干燥,結(jié)塊后不能使用。

    (2) 亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等:冷凍保存,使用時(shí),要常溫解凍,避免水浴加熱。

    (3) 抗生素類:冷藏保存,溫度過高會(huì)導(dǎo)致靈敏度的下降。

    (4) 兔血漿:冷藏保存少量的紅色不會(huì)影響結(jié)果。

    6、 觀察時(shí)間的掌握:

     SN、GB 等標(biāo)準(zhǔn)或培養(yǎng)基的使用說明所述時(shí)間進(jìn)行觀察,時(shí)間過短或時(shí)間過長(zhǎng),單菌落的特征都不會(huì)很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基,時(shí)間短單菌落看不到卵磷脂環(huán),時(shí)間長(zhǎng)綿羊李氏菌也會(huì)產(chǎn)生沉淀環(huán)。OXA、PALCAM的觀察也如此,時(shí)間過長(zhǎng),李氏菌使整個(gè)平板成黑色,不利于觀察單個(gè)菌落。

    7、 添加劑的添加:

    (1)溫度的掌握。卵黃和抗生素類添加的溫度都不應(yīng)太高。

    (2)定量。過多會(huì)抑制一些目標(biāo)菌,太少又導(dǎo)致雜菌的過度生長(zhǎng)。

    8、 培養(yǎng)溫度的掌握:

    (1)真菌類。25-28℃培養(yǎng)

    (2)細(xì)菌類。李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在 30℃左右。

    (3)其他一般在 36℃左右。

    9、 接種方法:

    常用的方法主要有劃線、三點(diǎn)接種、穿刺接種、傾注接種、涂布接種、液體接種。

    10、革蘭氏染色方法:

    染色時(shí)間的掌握、沖洗的方法。

    11、生化實(shí)驗(yàn):

    (1)接種的方法

    (2)氧化型和發(fā)酵型實(shí)驗(yàn)操作

    (3)陽性菌種的對(duì)照

    (4)接種前的純化。挑取單個(gè)菌落進(jìn)行一系列的生化。

    12、關(guān)于殺菌的幾個(gè)概念:

    (1)抑制:是在亞抑制劑量因子作用下導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)停止,但在移去這些因子后生長(zhǎng)仍可以恢復(fù)的生物學(xué)現(xiàn)象。

    (2)死亡:在致死劑量因子的作用下或在亞致死劑量因子長(zhǎng)時(shí)間的作用下,導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)能力不可逆喪失,即使移去這種因子后生長(zhǎng)仍不能恢復(fù)的生物學(xué)現(xiàn)象。

    (3)防腐:在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下,能防止或抑制微生物生長(zhǎng)的一種措施,它能防止食物霉變。

    (4)消毒:利用某種方法殺死或滅活物質(zhì)或物體中原微生物的一種措施,它可以起到防止感染和傳播的作用。

    (5)滅菌:利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的原微生物的一種措施。


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